新聞動態(tài)
微生物限度檢查有哪些常見方法？
微生物限度檢查是評估非無菌藥品、食品、化妝品等產(chǎn)品中微生物污染程度的重要手段，通常包括微生物計數(shù)檢查（定量）和控制菌檢查（定性）兩部分。根據(jù)樣品性質(zhì)（如是否含抑菌成分、劑型、溶解性等），可選擇不同的檢測方法。以下是常見的微生物限度檢查方法：
一、微生物計數(shù)檢查常用方法
1、薄膜過濾法（Membrane Filtration Method）
·適用對象：含抑菌成分、難溶性或高濃度樣品（如抗生素、注射劑等）。
·原理：將樣品通過0.45μm濾膜過濾，微生物被截留在膜上，再用沖洗液去除抑菌物質(zhì)，將濾膜貼于培養(yǎng)基上培養(yǎng)并計數(shù)。
·優(yōu)點：可有效去除干擾物質(zhì)，回收率高。
2、平皿計數(shù)法（傾注法，Pour Plate Method）
·適用對象：水溶性、無抑菌活性的供試品（如普通口服液、片劑溶液等）。
·原理：將稀釋后的樣品與熔化的瓊脂培養(yǎng)基混合，冷卻凝固后培養(yǎng)，計數(shù)菌落。
·注意：操作溫度需控制在45℃以下，避免熱敏感微生物失活。
3、涂布法（Spread Plate Method）
·適用對象：對熱敏感的微生物（如某些酵母菌、霉菌）或需觀察典型菌落形態(tài)的樣品。
·原理：先將培養(yǎng)基倒入平皿凝固，再將稀釋樣品涂布于表面，培養(yǎng)后計數(shù)。
·優(yōu)點：避免高溫對微生物的損傷。
4、可能數(shù)法（MPN法，Most Probable Number）
·適用對象：微生物含量極低、分布不均或難以用平板計數(shù)的樣品（如中藥材、水質(zhì)、某些乳制品）。
·原理：基于統(tǒng)計學(xué)模型，通過多個稀釋度接種液體培養(yǎng)基，根據(jù)陽性管數(shù)查MPN表估算微生物數(shù)量。
·特點：靈敏度較低但適用于特殊樣品。
二、控制菌檢查（定性檢測）
1、用于檢測特定致病菌或指示菌，常見目標(biāo)菌包括：
·大腸埃希菌（Escherichia coli）
·金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
·銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）
·沙門氏菌（Salmonella spp.）（如嬰幼兒食品、中藥飲片等）
·梭菌（Clostridium spp.）
2、常用方法：
·直接接種法：將樣品直接接種至選擇性增菌培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后分離鑒定。
·增菌-分離-確證三步法：符合《中國藥典》等法規(guī)要求的標(biāo)準(zhǔn)流程。
三、方法選擇依據(jù)
·樣品是否具有抑菌性
·樣品的物理狀態(tài)（液體、固體、半固體）
·微生物的預(yù)期種類與數(shù)量
·是否符合藥典或國家標(biāo)準(zhǔn)（如《中國藥典》四部通則1105、1106）
四、補充說明
·對于含抗菌成分的樣品，常需使用中和劑或采用薄膜過濾法以消除抑菌干擾。
·所有操作應(yīng)在潔凈環(huán)境*（如B級背景下的A級層流）中進(jìn)行，防止外源污染。
劉先生